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引物純度和穩(wěn)定性分析

日期:2024-10-19 05:29
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摘要: 引物純度和穩(wěn)定性分析如下: 定制引物的標準純度對于大多數PCR應用是足夠的。因脫鹽而除去的苯甲?;彤惗□;苌?,因此不會干擾PCR。部分應用需要純化,以除去在合成過程中的任何非全長序列。這些截斷序列的產生是因為DNA合成化學的效率不是100%。這是個循環(huán)過程,在每個堿基加入時使用重復化學反應,使DNA從3'到5'合成。在任何一個循環(huán)都可能失敗。較長的引物,尤其是大于50個堿基,截斷序列的比例很大,可能需要純化。 引物產量受合成化學的效率及純化方法的影響。定制引物以干粉形式運輸。zui 好在TE重溶...

引物純度和穩(wěn)定性分析如下:

  定制引物的標準純度對于大多數PCR應用是足夠的。因脫鹽而除去的苯甲酰基和異丁?;苌伲虼瞬粫蓴_PCR。部分應用需要純化,以除去在合成過程中的任何非全長序列。這些截斷序列的產生是因為DNA合成化學的效率不是100%。這是個循環(huán)過程,在每個堿基加入時使用重復化學反應,使DNA從3'到5'合成。在任何一個循環(huán)都可能失敗。較長的引物,尤其是大于50個堿基,截斷序列的比例很大,可能需要純化。  

  引物產量受合成化學的效率及純化方法的影響。定制引物以干粉形式運輸。zui 好在TE重溶引物,使其zui 終濃度為100μM。TE比去離子水好,因為水的pH經常偏酸,會引起寡核苷的水解。


  引物的穩(wěn)定性依賴于儲存條件。應將干粉和溶解的引物儲存在-20℃。以大于10μM濃度溶于TE的引物在-20℃可以穩(wěn)定保存6個月,但在室溫(15℃到30℃)僅能保存不到1周。干粉引物可以在-20℃保存至少1年,在室溫(15℃到30℃)zui 多可以保存2個月。

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