原代細胞是從生物體內(nèi)直接分離并在體外培養(yǎng)的細胞。它們保持了從其來源組織或器官中獲取的特異性和生物學(xué)真實性。原代細胞通常具有有限的壽命，因為它們在培養(yǎng)中會逐漸老化并終死亡。原代細胞的培養(yǎng)條件：

一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

1、細胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；

2、細胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L；

3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；

4、 胎牛血清濃度為10%-80%；

5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落，漂?。?

7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細胞換液；

8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時，應(yīng)將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

二、懸浮細胞培養(yǎng)

1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞；

2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行；

3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進行分瓶試驗；

4、長期培養(yǎng)時，淋 巴細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長；

5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；

6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。