主營產(chǎn)品：
生化試劑，標(biāo)準(zhǔn)品,對(duì)照品，PCR試劑盒，?核酸檢測試劑盒，熒光定量檢測試劑盒，生化試劑盒?，比色法試劑盒，酶活性檢測試劑盒，ELISA試劑盒，酶聯(lián)免yi檢測試劑盒，試劑盒，ELISA試劑盒，抗體，重組蛋白，分光光度法檢測試劑盒，細(xì)胞株，原代細(xì)胞，細(xì)胞培養(yǎng)基，標(biāo)準(zhǔn)溶液產(chǎn)品。代理并銷售進(jìn)口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細(xì)胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產(chǎn)品。
咨詢電話：18117197628
大腸桿菌PCR檢測試劑盒PCR引物二聚體減除方法
日期：2024-10-19 04:28
瀏覽次數(shù)：67
摘要：
大腸桿菌PCR檢測試劑盒PCR引物二聚體減除方法：
如果出現(xiàn)了引物二聚體，有許多方法可以減少或消除反應(yīng)中的引物二聚體。
1、 首先是優(yōu)化熱循環(huán)條件，這主要是提高退火溫度。大多數(shù)情況下，兩步循環(huán) (由 95°C 變性步驟直接進(jìn)入60°C 退火和延伸步驟) 有利于強(qiáng)效擴(kuò)增，因此引物設(shè)計(jì)時(shí)設(shè)定的成功退火溫度為 60°C。
2、可降低引物濃度，甚至采用不同的正向引物和反向引物的比值也有一定的幫助。大多數(shù)情況下，每條引物的理想終濃度為 200 nM，但如有需要，可將濃度降至 60 nM。
3、鎂的合適濃度一般約為 3 mM...
大腸桿菌PCR檢測試劑盒PCR引物二聚體減除方法：
如果出現(xiàn)了引物二聚體，有許多方法可以減少或消除反應(yīng)中的引物二聚體。
1、 首先是優(yōu)化熱循環(huán)條件，這主要是提高退火溫度。大多數(shù)情況下，兩步循環(huán) (由 95°C 變性步驟直接進(jìn)入60°C 退火和延伸步驟) 有利于強(qiáng)效擴(kuò)增，因此引物設(shè)計(jì)時(shí)設(shè)定的成功退火溫度為 60°C。
2、可降低引物濃度，甚至采用不同的正向引物和反向引物的比值也有一定的幫助。大多數(shù)情況下，每條引物的理想終濃度為 200 nM，但如有需要，可將濃度降至 60 nM。
3、鎂的合適濃度一般約為 3 mM。高于此濃度易形成引物二聚體。
4、如果未對(duì)引物形成二聚體的傾向進(jìn)行評(píng)估，則應(yīng)補(bǔ)充評(píng)估并考慮重新設(shè)計(jì) (如有需要)。通常情況下，使用熱啟動(dòng) DNA 聚合酶，并在冰上進(jìn)行反應(yīng)。
5、在理論上，針對(duì)同一靶點(diǎn)應(yīng)同時(shí)檢測多個(gè)引物組。這實(shí)際上可以節(jié)省大量時(shí)間，因?yàn)槿绻@些引物中的一個(gè)能立即發(fā)揮作用，則可以減少花費(fèi)在優(yōu)化過程上的時(shí)間。
細(xì)胞因子elisa試劑盒液體類標(biāo)本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。