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產(chǎn)品詳情
  • 產(chǎn)品名稱:人1,3-二磷酸甘油酸(1,3-BPG)ELISA Kit

  • 產(chǎn)品型號(hào):PH103676
  • 產(chǎn)品**:派瑞曼
  • 產(chǎn)品文檔:
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簡(jiǎn)單介紹:
人1,3-二磷酸甘油酸(1,3-BPG)ELISA Kit檢測(cè)目的:用于測(cè)定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測(cè)包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本..
詳情介紹:

試劑配制:

1、酶聯(lián)板assay plate :一塊96孔或者48孔。
2、標(biāo)準(zhǔn)品standard:2瓶?jī)龈善贰?br> 3、樣品稀釋液sample diluent:1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液biotin-antibody diluent:1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 hrp-avidin diluent:1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體biotin-antibody:1×120μl/瓶1:100
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素hrp-avidin:1×120μl/瓶1:100
8、底物溶液tmb e:1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液wash buffer:1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液stop solution:1×10ml/瓶2n h2so4。

試劑準(zhǔn)備:
1. 使用前將所有的試劑和標(biāo)本緩慢均衡至室溫(18-25oC),試劑不能直接在37oC溶解。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品):每瓶標(biāo)準(zhǔn)品加入標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1mL,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為2000pg/mL。準(zhǔn)備7個(gè)稀釋標(biāo)準(zhǔn)品的EP管,每個(gè)EP管中加入150μL的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液,如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度, 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
3. 濃洗滌液:用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL,進(jìn)行30倍稀釋。

我司主營(yíng)產(chǎn)品之一,產(chǎn)品皆嚴(yán)格按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行生產(chǎn),并經(jīng)過了嚴(yán)格地反復(fù)地檢測(cè),我們以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膽B(tài)度保證產(chǎn)品的質(zhì)量,從而保證您的實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行。產(chǎn)品供貨周期短,供貨及時(shí),且我司還提供完整的售前和售后服務(wù)。本公司產(chǎn)品僅用于科研。

產(chǎn)品名稱

人1,3-二磷酸甘油酸(1,3-BPG)ELISA Kit

英文名稱

Human 1,3-Bisphosphoglycerate(1,3-BPG)ELISA Kit

貨號(hào)

PH103676

樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。

注意事項(xiàng):

1. 試劑盒應(yīng)在有效期內(nèi)使用,請(qǐng)不要使用過期的試劑。
2. 試劑盒未使用時(shí)應(yīng)保存在 2-8℃冰箱,已復(fù)溶但未用完的標(biāo)準(zhǔn)品,請(qǐng)丟棄。
3. 試劑盒使用前請(qǐng)?jiān)谑覝鼗謴?fù) 30 min,且充分混勻試劑盒里的各種成份及制備的樣品。
4. 在試驗(yàn)中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本建議作復(fù)孔檢測(cè),且加入試劑的順序應(yīng)保持一致。
5. 為避免交叉污染,請(qǐng)?jiān)谠囼?yàn)中使用 1 次性試管,槍頭,封板膜及潔凈塑料容器。
6. 濃縮生物素化抗體和濃縮酶結(jié)合物的體積較少,在運(yùn)輸過程中微量液體會(huì)沾到管壁及瓶蓋上,使用前請(qǐng)離心處理(5-10 S 即可),使管壁上的液體集中在管底部,取用時(shí),請(qǐng)用移液器小心吹打幾次。
7. 除了試劑盒中的濃縮洗滌液和終止液可以通用外,請(qǐng)不要使用其他來源試劑盒內(nèi)含的試劑代替本試劑盒中的某單個(gè)組分。
8. 為保證結(jié)果準(zhǔn)確,每次檢測(cè)均需做標(biāo)準(zhǔn)曲線。

操作流程:
1)待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。 
2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
4)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。 
6)洗板,同(4)。 
7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。 
9)洗板,同(4)。 
10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
12)分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測(cè)得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)。
硝基0.98 250mg

木糖0.999 250mg

1-甲基-5-硝基-2-羥甲基(羥甲基甲硝/二甲硝代謝物)(含干冰運(yùn)輸費(fèi))0.989 10mg

Parathion0.998 100mg

12種揮發(fā)性有機(jī)物-VOC混標(biāo)(DB44/816-2010表面涂裝(汽車**業(yè))揮發(fā)性有機(jī)化合物排放標(biāo)準(zhǔn))-(冰袋運(yùn)輸)1000μg/mL 1mL

0.98 1g

L-(+)-酒石酸0.993 250mg

莎稗磷(莎薭磷)0.974 100mg

格列美脲0.98 100mg

富馬酸泰妙素0.97 100mg

1-己醇0.992 1mL細(xì)胞核轉(zhuǎn)錄因子X盒結(jié)合蛋白抗體

XAB2蛋白抗體

乙型肝炎X蛋白HBX抗體(N端)

乙型肝炎X蛋白HBX抗體

軟骨細(xì)胞蛋白39抗體

14-3-3E蛋白抗體

磷酸化14-3-3E蛋白抗體

y-盒結(jié)合蛋白1抗體

原癌基因酪氨酸蛋白激酶Yes1抗體

磷酸化原癌基因酪氨酸蛋白激酶Yes1抗體

核酸敏感元件結(jié)合蛋白1

核轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子YY1抗體

磷酸化原癌基因Yes相關(guān)蛋白1抗體

人1,3-二磷酸甘油酸(1,3-BPG)ELISA KitATF1  活化轉(zhuǎn)錄因子1抗體 0.1ml

脫氧核糖核酸酶Ⅹ(DNASEⅩ)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗(yàn)法)    ELISA Kit for Deoxyribonuclease X (DNASEX)    規(guī)格:48T/96T 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)

FXR1  脆性X相關(guān)蛋白1抗體 0.2ml

巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶6(FUT6)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗(yàn)法)    ELISA Kit for Fucosyltransferase 6 (FUT6)    規(guī)格:48T/96T 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)

phospho-B-Raf (Ser444)  磷酸化B-Raf抗體 0.1ml

Cullin 3蛋白(CUL3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗(yàn)法)    ELISA Kit for Cullin 3 (CUL3)    規(guī)格:48T/96T 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)

phospho-CTNNA1 (Ser641)  磷酸化α-連環(huán)蛋白抗體 0.1ml

Metaxin 2蛋白(MTX2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗(yàn)法)    ELISA Kit for Metaxin 2 (MTX2)    規(guī)格:48T/96T 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)

CD14  內(nèi)受體抗體 0.1ml

Actamin 7蛋白(A7)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗(yàn)法)    ELISA Kit for Actamin 7 (A7)    規(guī)格:48T/96T 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)

CD75  唾液酸轉(zhuǎn)移酶1/α-2,6唾液酸轉(zhuǎn)移酶抗體 0.2ml

Nesprin 2蛋白(Nesp2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗(yàn)法)    ELISA Kit for Nesprin 2 (Nesp2)    規(guī)格:48T/96T 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)

 


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