英文簡(jiǎn)稱(chēng)：A431(A-431)細(xì)胞

產(chǎn)品名稱(chēng)：表皮癌細(xì)胞

運(yùn)輸和保存：

視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。

1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。

2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法； 

2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為玻璃制造，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理； 

3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕； 

4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率； 

5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴(lài)氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：

1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞

在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。

3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性

通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類(lèi)型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。

4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄

采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。

250ml Glycine Buffer in PBS,0.2M,pH2.5   Glycine Buffer in PBS,0.2M,pH2.5   常溫保存　CD183 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 IHC-P    50 μg

250mL Glycine Buffer in PBS,0.2M,pH3.0   Glycine Buffer in PBS,0.2M,pH3.0   常溫保存　CXCR3 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 WB    50 μg

250mL Glycine Buffer in PBS,0.2M,pH6.5   Glycine Buffer in PBS,0.2M,pH6.5   常溫保存　CD137 / 4-1BB 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA    50 μL

250mL Glycine Buffer in PBS,0.2M,pH7.0   Glycine Buffer in PBS,0.2M,pH7.0   常溫保存　CD137 / 4-1BB / TNFRSF9 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA    50 μL

250mL Glycine Buffer in PBS,0.2M,pH7.2   Glycine Buffer in PBS,0.2M,pH7.2   常溫保存　CD137 / 4-1BB 抗體, 兔多抗 ELISA    400 μL

250mL Glycine Buffer in PBS,0.2M,pH7.4   Glycine Buffer in PBS,0.2M,pH7.4   常溫保存　XCR5 (CD185) 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 WB    50 μg

250mL Glycine Buffer（甘氨酸緩沖液）,0.2M,pH2.5   Glycine Buffer,0.2M,pH2.5   常溫保存　PAX3 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 WB    50 μg

250mL Glycine Buffer（甘氨酸緩沖液）,0.2M,pH3.0   Glycine Buffer,0.2M,pH3.0   常溫保存　cd207 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 WB    50 μg

250mL Glycine Buffer（甘氨酸緩沖液）,0.2M,pH3.5   Glycine Buffer,0.2M,pH3.5   常溫保存　CCR1 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 WB   IHC-P   IF  IP   ICC/IF    50 μg

100mL Glycylglycine Buffer,0.5M,pH7.5   Glycylglycine Buffer,0.5M,pH7.5   常溫保存　CD166 / ALCAM 抗體, 鼠單抗 FCM   IF   ICC/IF   50 μg

100mL Glycylglycine Buffer,0.5M,pH8.0   Glycylglycine Buffer,0.5M,pH8.0   常溫保存　CD191 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 WB   IHC-P   IP   50 μg

100mL Glycylglycine Buffer,0.5M,pH8.5   Glycylglycine Buffer,0.5M,pH8.5   常溫保存　CD166 / ALCAM 抗體, 鼠單抗 ELISA    50 μg

100mL Glycylglycine Buffer,0.5M,pH9.0   Glycylglycine Buffer,0.5M,pH9.0   常溫保存　CD166 / ALCAM 抗體, 兔多抗 ELISA    400 μg

表皮癌細(xì)胞phospho-B-Raf (Thr597)  磷酸化B-Raf抗體規(guī)格: 0.1ml

phospho-B-Raf (Thr401)  磷酸化B-Raf抗體規(guī)格: 0.1ml

BRCA1/BAP1  乳腺癌易感基因1抗體規(guī)格: 0.1ml

Phospho-BAP1(Ser592)  磷酸化乳腺癌易感基因1抗體(人)規(guī)格: 0.1ml

Phospho-BRCA1(Ser1524)  磷酸化乳腺癌易感基因1抗體規(guī)格: 0.1ml

BRCC4/BRCC45  乳腺癌易感基因復(fù)合蛋白4抗體規(guī)格: 0.2ml

Phospho-BRCA1(Ser1189)  磷酸化乳腺癌易感基因1抗體規(guī)格: 0.1ml

Phospho-BRCA1(Ser1423)  磷酸化乳腺癌易感基因1抗體規(guī)格: 0.1ml

BRCA1/BAP1  乳腺癌易感基因1抗體規(guī)格: 0.1ml

BRCA2  乳腺癌易感基因2抗體規(guī)格: 0.1ml

BrdU  溴脫氧尿苷抗體規(guī)格: 0.1ml

BrdU(A7)  溴脫氧尿苷單克隆抗體規(guī)格: 0.1ml

BrdU  溴脫氧尿苷抗體規(guī)格: 0.2ml

細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：

1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞

在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。

3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性

通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類(lèi)型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。

4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄

采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。