規(guī)格參數(shù)：

產(chǎn)品名稱：BL21 DE3 pLysS大腸桿菌說明書

拉丁文: Escherichia coli BL21(DE3)pLysS

提供形式: 西林瓶，菌片

**等級(jí): 1

模式菌株: 未知

應(yīng)用領(lǐng)域: 用于蛋白表達(dá)

培養(yǎng)基: LB瓊脂培養(yǎng)基:酵母提取物 5.0 g,蛋白胨 10.0 g,NaCl 10.0 g,瓊脂 15.0 g,蒸餾水 1.0 L,pH 7.0。121℃，15min**。

生長(zhǎng)條件: 37℃，有氧，LB

本公司產(chǎn)品僅用科研實(shí)驗(yàn)

儀器設(shè)備與器具：

1 恒溫培養(yǎng)箱：36±1℃。

2 1000ml三角燒瓶、1ml、10ml移液管。

3 接種針。

4 顯微鏡。

5 超凈工作臺(tái)。

6 玻片、酒精燈、洗耳球、試管架。

7 天平：感量0.01g。

8 菌釜。

9 培養(yǎng)皿（直徑為90mm）、試管，經(jīng)121℃、30分鐘菌。

10試管夾、酒精燈、秒表、載玻片

保存方法：

傳代保存法：培養(yǎng)基的濃度不宜過高，營(yíng)養(yǎng)成分不宜過于豐富，尤其是碳水化合物的濃度應(yīng)在可能的范圍內(nèi)盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于適生長(zhǎng)溫度為好。若為產(chǎn)酸菌種，則應(yīng)在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣 [3] 。

液體石蠟覆蓋保存法：該法較前一種方法保存菌種的時(shí)間更長(zhǎng)，適用于霉菌、酵母菌、放線菌及需氧等的保存。

懸液保存法：

① 蒸餾水保存法：適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌，將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數(shù)年。本法應(yīng)注意避免水分的蒸發(fā)。

② 糖液保存法：適用于酵母菌，如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中，然后于冷暗處保存，可長(zhǎng)達(dá)10年。除此之外，也可使用緩沖液或食鹽水等進(jìn)行保存。

載體保存法：①土壤保存法；②砂土保存法；③硅膠保存法；④磁珠保存法；⑤麩皮保存法；⑥紙片(濾紙)保存法。

常用的冷凍保存法：

① 低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃)：低溫冷凍保存時(shí)使用螺旋口試管較為方便，也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時(shí)菌液加量不宜過多，有些可添加保護(hù)劑。此外，也可用φ5mm的玻璃珠來吸附菌液，然后把玻璃珠置于塑料容器內(nèi)，再放入低溫冰箱內(nèi)進(jìn)行保存的。

② 干冰保存法(-70℃左右)：即將菌種管插入干冰內(nèi)，再置于冰箱內(nèi)進(jìn)行冷凍保存。

③ 液氮保存法(-196℃)：是適用范圍廣的微生物保存法。

微生物菌種的培養(yǎng)：

⒈ 孢子制備

⑴ 放線菌孢子的制備

一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營(yíng)養(yǎng)成分，如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機(jī)鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1％，氮源不超過0.5％)，碳源豐富容易造成生理酸性的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境，不利于放線菌孢子的形成，氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下，干燥和限制營(yíng)養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。放線菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃，少數(shù)為37 ℃，培養(yǎng)時(shí)間為5～14天。

⑵ 霉菌孢子的制備

霉菌的孢子培養(yǎng)，一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營(yíng)養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖，而且這類培養(yǎng)基的表面積較大，可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25～28 ℃，培養(yǎng)時(shí)間為4～14天。

⒉ 種子制備

⑴ 搖瓶種子制備

搖瓶種子進(jìn)罐，常采用母瓶、子瓶?jī)杉?jí)培養(yǎng)，有時(shí)母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和完全，并易被菌體分解利用，氮源豐富有利于菌絲生長(zhǎng)。原則上各種營(yíng)養(yǎng)成分不宜過濃，子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高，更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。

⑵ 種子罐種子制備

種子罐種子制備的工藝過程，因菌種不同而異，一般可分為種子、二級(jí)種子和三級(jí)種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中，經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲，這樣的種子稱為種子，把種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，稱為二級(jí)發(fā)酵。如果將種子接入體積較大的種子罐內(nèi)，經(jīng)過培養(yǎng)形成更多的菌絲，這樣制備的種子稱為二級(jí)種子，將二級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，稱為三級(jí)發(fā)酵。同樣道理，使用三級(jí)種子的發(fā)酵，稱為四級(jí)發(fā)酵。

豬受磷蛋白(PLN)吸附測(cè)定試劑盒

豬干擾素誘導(dǎo)T細(xì)胞α亞族趨化因子 (I-TAC)吸附測(cè)定試劑盒

豬趨化因子CCL3樣蛋白1(CCL3L1)吸附測(cè)定試劑盒

豬胃泌素抑制肽(GIP)吸附測(cè)定試劑盒  

豬凝血因子Ⅱ(F2)吸附測(cè)定試劑盒

豬果糖二磷酸醛縮酶A(ALDOA)吸附測(cè)定試劑盒

豬脂肪酶H (LIPH)吸附測(cè)定試劑盒

豬細(xì)絲蛋白Bβ(FLNβ)吸附測(cè)定試劑盒

豬球蛋白G Fc段受體II(FcγR II/CD32)吸附測(cè)定試劑盒

豬血管抑素/血管穩(wěn)定蛋白(ANG)吸附測(cè)定試劑盒  

豬腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(BDNF) 吸附測(cè)定試劑盒

BL21 DE3 pLysS大腸桿菌說明書2-甲基四氫呋喃(MeTHF)(Standard for GC,≥99.5%(GC))CAS號(hào)：96-47-9Standard for GC,≥99.5%(GC)2-Methyltetrahydrofuran

異戊烷(Standard for GC,≥99.7%(GC))CAS號(hào)：78-78-4Standard for GC,≥99.7%(GC)2-Methylbutane

丙烯酸甲酯（MA）(Standard for GC,>99%(GC))CAS號(hào)：96-33-3Standard for GC,>99%(GC)Methyl acrylate

丁酸甲酯(Standard for GC,>99.5%(GC))CAS號(hào)：623-42-7Standard for GC,>99.5%(GC)Methyl butyrate

α-甲基丙烯酸(Standard for GC)CAS號(hào)：79-41-4Standard for GCMethylacrylic acid

乙二醇甲醚(standard for GC,>99.7%(GC))CAS號(hào)：109-86-4standard for GC,>99.7%(GC)2-Methoxyethanol

N-甲基吡咯烷酮（NMP）(standard for GC,≥99.6%(GC))CAS號(hào)：872-50-4standard for GC,≥99.6%(GC)1-Methyl-2-pyrrolidinone

異丁醇(standard for GC,≥99.5%(GC))CAS號(hào)：78-83-1standard for GC,≥99.5%(GC) 2-Methyl-1-propanol

甲基環(huán)己烷(Standard for GC,≥99.8%(GC))CAS號(hào)：108-87-2Standard for GC,≥99.8%(GC)Methylcyclohexane

乙酸甲酯(GCS,≥99.9% (GC))CAS號(hào)：79-20-9GCS,≥99.9% (GC)Methyl acetate

基本概念：

(1)菌群：由多種合組成的相對(duì)穩(wěn)定的群體，具有某些共同性狀。如大腸菌群包括大腸桿菌、產(chǎn)氣腸他們之間的過渡類型。

(2) 菌屬：菌種的上分類，通常性狀相近、親緣關(guān)系密切的若干菌種組成一個(gè)菌屬，如芽孢桿菌屬、葡萄球菌屬、乳桿菌屬等。

(3)是基本的分類單位，通常指表型特征相似、親緣關(guān)系接近的一類群體，與同屬內(nèi)其他種有著明顯差異；當(dāng)涉及到保存時(shí)，菌種是指的種子（用來長(zhǎng)期保存）資源。

(4) 菌型：同一菌種的不同，在某些方面存在較小差異的為同一菌型，通常一個(gè)菌種內(nèi)的可以分為多種不同的菌型。

(5) 菌株：由一個(gè)獨(dú)立分離的單細(xì)胞系培養(yǎng)而成的純遺傳型群體及其一切后代，一種微生物的每一個(gè)不同來源的純培養(yǎng)物均可稱為該菌種的一個(gè)菌株。