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自備儀器和試劑耗材:
儀器準(zhǔn)備:
1.離心機(jī)
2.振蕩器
3.勻漿機(jī)/勻漿器
4.渦旋混勻器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
試劑準(zhǔn)備:
1.PBS 緩沖液
2.蛋白定量試劑盒
耗材準(zhǔn)備:
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
產(chǎn)品簡介:
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
檢測方法 |
適用樣本 |
保存溫度 |
貨號 |
昆蟲總蛋白提取試劑盒 |
50T/100T |
雙向電泳 |
昆蟲 |
2-8℃ |
BH-D85344 |
使用方法:
旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底,避免開蓋時(shí)液體灑落。
蛋白酶抑制劑在 2-8℃時(shí)是固體狀態(tài),從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或 37℃短時(shí)間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
實(shí)驗(yàn)過程中的所有試劑須預(yù)冷;所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。整個(gè)過程須保持樣品處于低溫。本公司產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)。
注意事項(xiàng):
1. 正式實(shí)驗(yàn)前請選取幾個(gè)樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn),以優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件,取得佳實(shí)驗(yàn)效果。
2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時(shí)試劑損失。
3. 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4. 樣品或試劑被污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5. 好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底殘留清潔劑。
6. 實(shí)驗(yàn)后完成后所有樣品及接觸過的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。
操作步驟:
A:組織中提取
1.收集 0.1g 組織,加入 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實(shí)驗(yàn)選擇),冰上用組織研磨器或勻 漿管研磨。
2.將勻漿后樣品轉(zhuǎn)移至 1.5ml 離心管中,11000rpm 5min,吸棄上清保留沉淀。
3.至步驟 2。
B:細(xì)胞中提取
1.收集約 10 8個(gè)細(xì)胞,3000rpm 5min(懸浮細(xì)胞直接離心,貼壁細(xì)胞使用細(xì)胞刮刀或胰蛋白酶消化離心收集 均可。注意用預(yù)冷 PBS 清洗殘留培養(yǎng)基和胰蛋白酶等),吸棄上清。
2.至步驟 1。
步驟 1:加 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實(shí)驗(yàn)選擇),冰上孵育 30min(每 10min 用移液槍 吹打一次),4°C 11000rpm 離心 5min,棄上清。
步驟 2:于上述步驟離心管中加入 200μl Lysis Buffer 2,置于冰上 30min(每 10min 渦旋一次),4°C 11000rpm 離心 5min,吸取上清于一新離心管中。
步驟 3:加入 40μl Balance Buffer 于上述步驟離心管中,用移液槍輕輕吹勻。
步驟 4:使用 BCA 定量試劑盒定量。
步驟 5:于步驟 3 離心管中加入 2.4μl Adjust Buffer,輕輕吹勻,并應(yīng)用于下游研究。
人抗巨噬細(xì)胞抗體(anti-macrophage Ab)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠P53(P53)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠P物質(zhì)(SP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
卵磷脂膽固醇脂酰轉(zhuǎn)移酶 48T/96T
小鼠胰蛋白酶原激活肽(TAP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人抑制素(INH)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
前列腺素E2 48T/96T
雞白介素18(IL-18)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
雄烯二酮 48T/96T
人腺苷脫氨酶(ADA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠磷酸肌醇3激酶(PI3K)ELISA 試劑盒試劑盒 組裝/原裝
昆蟲總蛋白提取試劑盒ATP敏感性鉀通道亞基kir6.2抗原 規(guī)格: 0.5mg Kir6.2 peptide
胎盤生長因子(多肽抗原) 規(guī)格: 0.5mg PLGF (Placenta growth factor)
半胱胺酸蛋白酶蛋白-12(多肽) 規(guī)格: 0.5mg Caspase-12
血管內(nèi)皮生長因子(多肽抗原) 規(guī)格: 0.5mg VEGF(Vascular endothelial growth factor)
周期素依賴性激酶7抗原 規(guī)格: 0.5mg CDK7/Cyclin H/MAT1
肉毒堿棕櫚?;D(zhuǎn)移酶1A多肽抗原 規(guī)格: 0.5mg CPT1A peptide
鼠疫耶爾森氏F1莢膜蛋白(C端多肽) 規(guī)格: 0.5mg F1 operon positive regulatory protein(CT)
橋粒斑蛋白1抗原 規(guī)格: 0.5mg DP-I/DSP(desmoplakin I )
磷脂酰基醇蛋白聚糖-4抗原 規(guī)格: 0.5mg Glypican 4(Glypican proteoglycan 4)
KT3 tag標(biāo)簽抗原 規(guī)格: 0.5mg KT3 tag
白介素1α抗原 規(guī)格: 0.5mg IL-1 Alpha (Interleukin-1 Alpha )
Olaquindox 喹乙醇 23696-28-8 20mg
超濾離心管 4ml-50KD 4ml 個(gè)
孵育盒 (避光) 29×19×4cm 個(gè)
Propylthiouracil 丙基硫氧嘧啶 25g 瓶
Tween-20 吐溫-20 100ml 瓶
Ammonium Persulfate 過硫酸銨 500g 瓶
D-蟲熒光素鈉鹽 25 mg 支
Coomassie brilliant blue G-250 考馬斯亮藍(lán)G-250 5g 瓶
Peroxidase(POD) 辣根過氧化物酶 10mg 支
Inosine,F(xiàn)ree Base 肌苷(次黃嘌呤核苷) 5g 瓶