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自備儀器和試劑耗材:
儀器準(zhǔn)備:
1.離心機(jī)
2.振蕩器
3.勻漿機(jī)/勻漿器
4.渦旋混勻器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
試劑準(zhǔn)備:
1.PBS 緩沖液
2.蛋白定量試劑盒
耗材準(zhǔn)備:
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
檢測(cè)方法 |
適用樣本 |
保存溫度 |
貨號(hào) |
無去垢劑細(xì)胞裂解液 |
100ml |
WB、IP等 |
細(xì)胞 |
2-8℃ |
BH-D85382 |
使用方法:
旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底,避免開蓋時(shí)液體灑落。
蛋白酶抑制劑在 2-8℃時(shí)是固體狀態(tài),從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或 37℃短時(shí)間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
實(shí)驗(yàn)過程中的所有試劑須預(yù)冷;所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。整個(gè)過程須保持樣品處于低溫。本公司產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)。
注意事項(xiàng):
1. 正式實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)選取幾個(gè)樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn),以優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件,取得佳實(shí)驗(yàn)效果。
2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時(shí)試劑損失。
3. 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4. 樣品或試劑被污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5. 好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底殘留清潔劑。
6. 實(shí)驗(yàn)后完成后所有樣品及接觸過的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。
操作步驟:
A:組織中提取
1.收集 0.1g 組織,加入 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實(shí)驗(yàn)選擇),冰上用組織研磨器或勻 漿管研磨。
2.將勻漿后樣品轉(zhuǎn)移至 1.5ml 離心管中,11000rpm 5min,吸棄上清保留沉淀。
3.至步驟 2。
B:細(xì)胞中提取
1.收集約 10 8個(gè)細(xì)胞,3000rpm 5min(懸浮細(xì)胞直接離心,貼壁細(xì)胞使用細(xì)胞刮刀或胰蛋白酶消化離心收集 均可。注意用預(yù)冷 PBS 清洗殘留培養(yǎng)基和胰蛋白酶等),吸棄上清。
2.至步驟 1。
步驟 1:加 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實(shí)驗(yàn)選擇),冰上孵育 30min(每 10min 用移液槍 吹打一次),4°C 11000rpm 離心 5min,棄上清。
步驟 2:于上述步驟離心管中加入 200μl Lysis Buffer 2,置于冰上 30min(每 10min 渦旋一次),4°C 11000rpm 離心 5min,吸取上清于一新離心管中。
步驟 3:加入 40μl Balance Buffer 于上述步驟離心管中,用移液槍輕輕吹勻。
步驟 4:使用 BCA 定量試劑盒定量。
步驟 5:于步驟 3 離心管中加入 2.4μl Adjust Buffer,輕輕吹勻,并應(yīng)用于下游研究。
兔子基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP-3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
和肽素 48T/96T
可溶性腫瘤壞死因子-受體2 48T/96T
胃動(dòng)蛋白1 48T/96T
人凝血酶抗凝血酶復(fù)合物(TAT)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/Gelatinase A)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人肥大細(xì)胞類胰蛋白酶(MCT)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白2(IGFBP-2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠鐵調(diào)素(Hepcidin)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
S100鈣結(jié)合蛋白A12 48T/96T
大鼠鐵調(diào)素(Hepc)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
無去垢劑細(xì)胞裂解液熒光素標(biāo)記刺激分子B7-1蛋白抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-CD80/B7-1/FITC
熒光素標(biāo)記B和T衰減蛋白抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-CD272/BTLA/FITC
熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化c-fos抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-Phospho-c-Fos (Ser32) /FITC
熒光素標(biāo)記高分子量角蛋白抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-CK-HMW/FITC
熒光素標(biāo)記抗Ⅶ膠原抗體(Ⅶ型膠原)抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-Collagen VII /FITC
熒光素標(biāo)記結(jié)締組織生長(zhǎng)因子抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-CTGF/FITC
熒光素標(biāo)記CD299抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-DC-SIGNR/CD299/FITC
熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化周期素E抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-phospho-Cyclin E(Thr62) /FITC
熒光素標(biāo)記抗登革熱病毒抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-Dengue Virus/FITC
熒光素標(biāo)記E-鈣粘附分子抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-E-cadherin/FITC
熒光素標(biāo)記表皮生長(zhǎng)因子抗體(大鼠)IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-EGF/FITC
羊抗豬IgG-HRP 0.1ml 支
馬臟器組織分離液試劑盒 200ml/KIT 盒
5×Tris-甘氨酸電泳緩沖液 500ml 瓶
5-Methyl-7-methoxyisoflavone 5-甲-7-甲氧基異黃酮 82517-12-2 20mg
Proanthocyanidin B3 原花青素B3 23567-23-9 10mg
Huperzine B 石杉?jí)A乙 103548-82-9 20mg
Cycloastragenol 環(huán)黃芪醇 84605-18-5 20mg
Konjac glucomannan 魔芋甘露聚糖 37220-17-0 20mg
5'-Gmpdisodiumsalt-GMP 鳥苷-5'-單磷酸二鈉 1333479 20mg
Sarcosine 肌氨酸 107-97-1 20mg