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操作步驟:
A:組織中提取
1.收集 0.1g 組織,加入 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實(shí)驗(yàn)選擇),冰上用組織研磨器或勻 漿管研磨。
2.將勻漿后樣品轉(zhuǎn)移至 1.5ml 離心管中,11000rpm 5min,吸棄上清保留沉淀。
3.至步驟 2。
B:細(xì)胞中提取
1.收集約 10 8個(gè)細(xì)胞,3000rpm 5min(懸浮細(xì)胞直接離心,貼壁細(xì)胞使用細(xì)胞刮刀或胰蛋白酶消化離心收集 均可。注意用預(yù)冷 PBS 清洗殘留培養(yǎng)基和胰蛋白酶等),吸棄上清。
2.至步驟 1。
步驟 1:加 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實(shí)驗(yàn)選擇),冰上孵育 30min(每 10min 用移液槍 吹打一次),4°C 11000rpm 離心 5min,棄上清。
步驟 2:于上述步驟離心管中加入 200μl Lysis Buffer 2,置于冰上 30min(每 10min 渦旋一次),4°C 11000rpm 離心 5min,吸取上清于一新離心管中。
步驟 3:加入 40μl Balance Buffer 于上述步驟離心管中,用移液槍輕輕吹勻。
步驟 4:使用 BCA 定量試劑盒定量。
步驟 5:于步驟 3 離心管中加入 2.4μl Adjust Buffer,輕輕吹勻,并應(yīng)用于下游研究。
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
檢測(cè)方法 |
適用樣本 |
保存溫度 |
貨號(hào) |
快速蛋白裂解液 |
25ml/50ml/100ml |
WB、IP等 |
細(xì)胞、組織 |
2-8℃ |
BH-D85384 |
自備儀器和試劑耗材:
儀器準(zhǔn)備:
1.離心機(jī)
2.振蕩器
3.勻漿機(jī)/勻漿器
4.渦旋混勻器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
試劑準(zhǔn)備:
1.PBS 緩沖液
2.蛋白定量試劑盒
耗材準(zhǔn)備:
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
使用方法:
旋帽離心管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底,避免開(kāi)蓋時(shí)液體灑落。
蛋白酶抑制劑在 2-8℃時(shí)是固體狀態(tài),從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或 37℃短時(shí)間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開(kāi)蓋。
實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的所有試劑須預(yù)冷;所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。整個(gè)過(guò)程須保持樣品處于低溫。本公司產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)。
注意事項(xiàng):
1. 正式實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)選取幾個(gè)樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn),以優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件,取得佳實(shí)驗(yàn)效果。
2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開(kāi)蓋時(shí)試劑損失。
3. 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4. 樣品或試劑被污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5. 好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底殘留清潔劑。
6. 實(shí)驗(yàn)后完成后所有樣品及接觸過(guò)的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。
C-反應(yīng)蛋白 48T/96T
干擾素-γ受體 48T/96T
人糖蛋白130(gp130)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人刀豆素A(ConA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶2(ERK2)Elisa試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
猴子內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人可溶性血小板內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
羰基化蛋白 48T/96T
人血小板生成素(TPO)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠睪酮(T)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人白介素22(IL-22)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
快速蛋白裂解液熒光素標(biāo)記白介素27受體抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-IL-27R/TCCR/FITC
熒光素標(biāo)記整合素avb3抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-Integrin avb3/FITC
熒光素標(biāo)記磷酸化蛋白酪氨酸激酶JAK-3抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-Phospho-Jak3 (Tyr980/981)/FITC
熒光素標(biāo)記牛β-乳球蛋白抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti- Beta-lactoglobulin/FITC
熒光素標(biāo)記肝臟型脂肪酸結(jié)合蛋白抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-LFABP/FABP-2 /FITC
熒光素標(biāo)記羧肽酶抑制劑抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-Lxn(Latexin)/FITC
熒光素標(biāo)記 巨噬炎癥因子1β 抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-MIP-1 Beta /FITC
熒光素標(biāo)記髓鞘堿性蛋白抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-MBP/FITC
熒光素標(biāo)記基質(zhì)金屬蛋白酶-15抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-MMP-15/FITC
熒光素標(biāo)記粘蛋白-4抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-mucin4/Muc4/FITC
熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化Ephrin B抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-Ephrin B (phospho Tyr298) /FITC
羊抗豬IgG(血清) 0.5ml 支
35mm培養(yǎng)皿 20套 包
膜封閉液 500ml 瓶
Angiotensin II 血管緊張素Ⅱ 10mg 支
Senegenin 遠(yuǎn)志皂苷元 2469-34-3 20mg
Lupeol 羽扇豆醇 545-47-1 20mg
Deltaline 德?tīng)査?1803152 20mg
Apiin 芹菜苷 26544-34-3 20mg
Acetamide Agar 乙酰胺瓊脂 250g 瓶
Agar,Powder 瓊脂粉 100g 瓶