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操作步驟:
A:組織中提取
1.收集 0.1g 組織,加入 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實(shí)驗(yàn)選擇),冰上用組織研磨器或勻 漿管研磨。
2.將勻漿后樣品轉(zhuǎn)移至 1.5ml 離心管中,11000rpm 5min,吸棄上清保留沉淀。
3.至步驟 2。
B:細(xì)胞中提取
1.收集約 10 8個(gè)細(xì)胞,3000rpm 5min(懸浮細(xì)胞直接離心,貼壁細(xì)胞使用細(xì)胞刮刀或胰蛋白酶消化離心收集 均可。注意用預(yù)冷 PBS 清洗殘留培養(yǎng)基和胰蛋白酶等),吸棄上清。
2.至步驟 1。
步驟 1:加 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實(shí)驗(yàn)選擇),冰上孵育 30min(每 10min 用移液槍 吹打一次),4°C 11000rpm 離心 5min,棄上清。
步驟 2:于上述步驟離心管中加入 200μl Lysis Buffer 2,置于冰上 30min(每 10min 渦旋一次),4°C 11000rpm 離心 5min,吸取上清于一新離心管中。
步驟 3:加入 40μl Balance Buffer 于上述步驟離心管中,用移液槍輕輕吹勻。
步驟 4:使用 BCA 定量試劑盒定量。
步驟 5:于步驟 3 離心管中加入 2.4μl Adjust Buffer,輕輕吹勻,并應(yīng)用于下游研究。
產(chǎn)品簡介:
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
檢測方法 |
適用樣本 |
保存溫度 |
貨號 |
蛋白酶和磷酸酶抑制劑混合物 |
250ul/ 1ml |
|
蛋白 |
2-8℃ 保存 |
BH-D85390 |
自備儀器和試劑耗材:
儀器準(zhǔn)備:
1.離心機(jī)
2.振蕩器
3.勻漿機(jī)/勻漿器
4.渦旋混勻器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
試劑準(zhǔn)備:
1.PBS 緩沖液
2.蛋白定量試劑盒
耗材準(zhǔn)備:
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
使用方法:
旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底,避免開蓋時(shí)液體灑落。
蛋白酶抑制劑在 2-8℃時(shí)是固體狀態(tài),從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或 37℃短時(shí)間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
實(shí)驗(yàn)過程中的所有試劑須預(yù)冷;所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。整個(gè)過程須保持樣品處于低溫。本公司產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)。
注意事項(xiàng):
1. 正式實(shí)驗(yàn)前請選取幾個(gè)樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn),以優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件,取得佳實(shí)驗(yàn)效果。
2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時(shí)試劑損失。
3. 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4. 樣品或試劑被污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5. 好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底殘留清潔劑。
6. 實(shí)驗(yàn)后完成后所有樣品及接觸過的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。
小鼠磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人PL12抗體/抗丙氨酰tRNA合成酶(PL12/AlaRS)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠肌球蛋白(Myosin)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
脫氧吡啶酚/脫氧吡啶啉 48T/96T
植物脯氨酸(proline)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人水通道蛋白4(AQP-4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人抗胰島素受體抗體(AIRA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
犬血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
豬白介素4(IL-4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
抑制素α 48T/96T
人β2糖蛋白1抗體IgM(β2-GP1 Ab IgM)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
蛋白酶和磷酸酶抑制劑混合物白介素-17B抗體 規(guī)格: 0.2ml Anti-IL-17B
白介素6受體β抗體 規(guī)格: 0.2ml Anti-IL-6R Beta/CD130/gp130
表面球蛋白樣轉(zhuǎn)錄因子2抗體 規(guī)格: 0.2ml Anti-ILT2/CD85j
驅(qū)動蛋白家族KIF17抗體 規(guī)格: 0.2ml Anti-KIF17
白相關(guān)球蛋白樣受體1抗體 規(guī)格: 0.2ml Anti-LAIR-1/CD305
肝臟型脂肪酸結(jié)合蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml Anti-LFABP/FABP-1
人巨病毒UL23抗體 規(guī)格: 0.1ml Anti-HCMV UL23
巨噬清道夫受體抗體 規(guī)格: 0.2ml Anti-MARCO
層粘連蛋白受體1單克隆抗體 規(guī)格: 0.1ml Anti-LAMR1
多藥耐藥相關(guān)蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml Anti-MRP1
胚胎干關(guān)鍵蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml Anti-Nanog
Peimisine 貝母辛 19773-24-1 10mg
Chrysin 白楊素 480-40-0 20mg
Gypenoside XLIX 絞股藍(lán)皂苷XLIX 94987-08-3 10mg
DL-Menthol DL-薄荷醇-薄荷腦 89-78-1 20mg
2×Taq PCR MasterMix (不含染料) 1ml 支
2×Taq PCR MasterMix (含染料) 1ml 支
Taq DNA Polymerase 1000U 支
Temperature Sensitive UNG (溫度敏感型)UNG酶 100U 瓶
反轉(zhuǎn)錄酶 M-MLV 10000u 支
PCR純化試劑盒 100T 盒