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786-O[786-0]人腎透明細(xì)胞腺癌細(xì)胞
英文名稱
786-O[786-0]:786O7860
產(chǎn)品形態(tài)
上皮細(xì)胞樣 貼壁生長
貨號(hào)
P-X635
產(chǎn)品分類
人細(xì)胞系
規(guī)格
1×106
包裝
株
來源
腎；腎細(xì)胞腺癌
用途
僅供科研研究使用
產(chǎn)品詳情：
細(xì)胞別稱：786-o; 786O; 786-0; 786.O; 786-O RCC; RCC 786-O; RCC_7860; RCC 7860; 7860; 786-0WT；人腎透明細(xì)胞腺癌細(xì)胞
種屬來源：人
年齡性別：男；58歲
組織來源：腎；腎細(xì)胞腺癌
生長特性：貼壁生長
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
背景簡介：786-O細(xì)胞源自一個(gè)原發(fā)性透明細(xì)胞癌。此細(xì)胞有微絨毛和橋粒，能在軟瓊脂是生長。 此細(xì)胞生成的一個(gè)PTH樣的多肽與乳癌和肺癌中的肽相似。這個(gè)多肽的N端與PTH相似，活性與PTH相似，分子量為6000道爾頓。
細(xì)胞規(guī)格：1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝
支原體檢測：無
基因表達(dá)情況：
保藏機(jī)構(gòu)：ATCC; CRL-1932 BCRC; 60243；中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所細(xì)胞資源中心
培養(yǎng)基：1640+10%FBS+PS
培養(yǎng)條件：氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃
凍存條件：無血清凍存液，液氮儲(chǔ)存
倍增時(shí)間：~24-45 hours
1）收到細(xì)胞后，75%酒精瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請(qǐng)拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。
2）請(qǐng)?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。
3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過程中會(huì)因振動(dòng)脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的完全培養(yǎng)基6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長密度達(dá)70%-80%以上，可以對(duì)細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中，若因運(yùn)輸振動(dòng)脫落的細(xì)胞需要離心回收。
4）備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請(qǐng)換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1：2傳代。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備DMEM培養(yǎng)基；胎牛血清，10%；雙抗，1%。
2）培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。
二．細(xì)胞處理：
1）凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL完全培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml完全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜
。天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況和細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。對(duì)于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法：1、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2、加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長消化時(shí)間），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。
3、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完全培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力，后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。
3）細(xì)胞凍存:收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時(shí)凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。下面T25瓶為例：
1、細(xì)胞凍存時(shí)按照細(xì)胞傳代的過程收集消化好的細(xì)胞到離心管中，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)，來決定細(xì)胞的凍存密度。一般細(xì)胞的推薦凍存密度為1×10?~1×10?個(gè)活細(xì)胞/ml.
2、1000rpm離心3-5min，去掉上清。用配制好的細(xì)胞凍存液重懸細(xì)胞 ，按每1ml凍存液含1×10?~1×10?個(gè)活細(xì)胞/ml分配到一個(gè)凍存管中將細(xì)胞分配到凍存管中，標(biāo)注好名稱、代數(shù)、日期等信息。
3、將要凍存的細(xì)胞置于程序降溫盒中，-80度冰箱中過夜，之后轉(zhuǎn)入液氮容器中儲(chǔ)存。同時(shí)記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續(xù)查閱和使用。
實(shí)驗(yàn)原理：
實(shí)驗(yàn)步驟：
1 將目的基因構(gòu)建到合適的慢病毒載體上，利用293T細(xì)胞進(jìn)行慢病毒包裝，獲得含目的基因的慢病毒；
2 轉(zhuǎn)染前24 h進(jìn)行細(xì)胞鋪板，轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞密度控制在80%左右；
3 天加入適量病毒懸液感染細(xì)胞，并置于37 ℃，5% CO2培養(yǎng)箱中孵育；
4 24 h后用新鮮培養(yǎng)基替換含有病毒的培養(yǎng)基，并繼續(xù)培養(yǎng)；
5 在轉(zhuǎn)染3-4天后開始加藥篩選培養(yǎng)，直至顯微鏡下觀察熒光細(xì)胞比例為100%，獲得穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞系。
公司正在出售的產(chǎn)品：
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OSGIN2蛋白抗體 |
魚白介素6(IL-6)elisa分析檢測試劑盒 |
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OSGIN2 |
魚熱休克蛋白40(HSP-40)elisa分析檢測試劑盒 |
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HEAT重復(fù)內(nèi)含蛋白7A蛋白抗體 |
HumanALT/GPTELISAKit |
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HEATR7A |
人丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶/谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT/GPT)elisa分析檢測試劑盒 |
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大鼠松弛肽/松弛素1(RLN1)elisa檢測試劑盒 |
IL-6 ELISA Kit |
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10倍酵母菌SD-TRP/URA培養(yǎng)基 |
NKD2 |
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支原體去除試劑10ml |
8號(hào)染色體開放閱讀框44抗體 |
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NKD2蛋白抗體 |
C8orf44 |
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PE-CY5標(biāo)記的兔抗犬IgM抗體 |
跨膜蛋白132A抗體 Anti-TMEM132A |
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Rabbit Anti-Dog IgM / PE-Cy5 |
磷酸化腫瘤抑制基因PTEN抗體 Anti-Phospho-PTEN(Ser380/Thr382/Thr383) |
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新型血小板相關(guān)血管內(nèi)皮分泌蛋白SCUBE1抗體 |
Phocein蛋白抗體 Anti-PREI3/Phocein |
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SCUBE1 |
PSD95結(jié)合蛋白3抗體 Anti-SAPAP3/PSD95BP3 |
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人EB病毒(EBv)抗體(IgG)elisa分析檢測試劑盒 |
小鼠葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)elisa分析檢測試劑盒 |
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Humanepstein-barrvirus(EBv)antibody(IgG)ELISAKit |
786-O[786-0]人腎透明細(xì)胞腺癌細(xì)胞GIPELISAKit |
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大鼠白蛋白elisa分析檢測試劑盒 |
人環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)elisa分析檢測試劑盒 |
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Rat albumin ELISA Kit |
cGMPELISAKit |